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天然竹汁中氨基酸含量的测定

2008-03-22 15:06:0039健康网社区
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  中国拥有丰富的竹类资源,目前竹汁的药用和食用价值也为人们所认识。竹汁清澄透明,竹香淡雅,爽口怡人,具有独特的天然性、营养性。竹汁中含有人体所必需的常量、微量元素、多种维生素、分解葡萄糖及近20种游离氨基酸,尤其含有人体无法合成的赖氨酸、组氨酸、冬氨酸、胱氨酸等,能够活化人体细胞,具有抗衰老保健作用,可作为抗氧化剂或保健食品开发原料使用。很多实验证明鲜竹汁具有清热化痰、镇惊开窍、清热宣肺、利咽止咳之功效。

  这些作用来源于竹汁含有多种复杂成分的混合物,尤其是氨基酸的化学成分。本文以广东特有的竹品种——青皮竹作原料,通过压榨的方法提取竹汁的化学成分,并对其各类氨基酸的含量进行了测定,这些实验结果为竹汁的产品开发提取实验依据。

  1实验方法

  1.1竹汁的提取

  (1)选材:选择经过l~5年生长的青皮竹作为原料。

  

  (2)竹材处理:将竹材去枝、去叶、水洗、晾干,备用。

  (3)压榨汁:竹材处理后,将备用竹材送入已清洁干净的压榨汁机内,压榨汁得竹汁(竹汁量为竹材的40%~50%),竹渣作造纸用原料。

  (4)分级过滤:将压榨出的竹汁先通过第一级的网筛过滤,除去压榨汁时带来的竹渣、枝条等粗物;再经二级纱网过滤,将竹汁内的一些大颗粒过滤除去;最后经微孔过滤,除去小颗粒,得到淡青色的浓竹汁。

  (5)紫外消毒处理:将竹汁放入装有高强度紫外光的容器中,保持15rain消毒,备用。

  1.2仪器

  日立835250型氨基酸自动分析仪。

  1.3供试样品的制备

  精取上述1.1提取的竹汁样品10.OOml,浓缩至hnl左右。样品浓缩液中加入3ml-10ml/L盐酸溶液,再加入lml去离子水,混合均匀后移入10ml的长颈安瓿瓶中,抽成真空封口,于110℃加热水解24h。

  水解完毕后放冷,启封安瓿,将水解液移至lOml量瓶中,以高纯水定容至刻度。精密吸取2ml,于50℃真空干燥箱中挥干,反复操作3次后取出,加入lml专用稀释液溶解均匀,以微孔滤膜滤入2ml洁净容器中,待测。

  1.4氨基酸测定

  测定条件:层析柱216mm×150mm,离子交换树脂日立2619型;缓冲液流速0.2ml·min-1,泵压90~120kg·cm-2,茚三酮流速0.5ml·min-1;泵压15~35kg·cm-2,柱温55℃,进样量50ul,标准品进样量3nmol/50ul,氧气压力O.28kg·cm-2。测定结果见表1。

  1.5重现性和回收率试验

  取制备好的样品溶液,按照选定的色谱条件,进样50ul,连续进样4次,根据测定的结果,计算其标准差和变异系数,以4次结果的平均值作为氨基酸的含量。

  在上述的测定方法中,加入1.00ml氨基酸标准溶液,测定各种氨基酸的回收率,结果见表1。

  2结果与讨论

  天然竹汁中氨基酸的分析结果表明,所含的氨基酸种类较丰富,达16种之多,其中尤以天冬氨基酸、谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸、精氨酸、丙氨酸含量为高,前三种氨基酸达到28rag/100ml~46mg/100ml,后三种也有10mg/100ml以上,人体必需的氨基酸含量也很高,这是天然竹汁具有药用和食用价值的基础。氨基酸是人体体内合成蛋白质的主要原料,各种氨基酸必须满足一定的构成比例,缺少任何一种或比例失调,都会影响蛋白质的合成,使人体免疫力下降。另外某些氨基酸还能够参与体内的代谢,同时在基因表达控制方面它和激素一样起着重要的作用,有关天然竹汁中氨基酸含量的多少在保健功效及药用功效上的作用,有待于进一步的探讨。本文的结果为其在保健和药用等方面的应用提供了参考依据。

  采用氨基酸自动分析仪测定,控制一定的测定条件,经重现性和回收率试验结果表明,其标准差、变异系数和回收率都较好(见表1),所用的测定方法准确可靠,可用于竹汁氨基酸的测定方法。但要注意层析柱的大小、离子交换树脂类型、缓冲液流速、泵压、茚三酮流速、柱温、进样量、氧气压力等测定条件的选择。

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